Выделение ДНК из банана

Для чего выделяют ДНК?

Для анализа улик

(в криминалистике)

Для тестирования новорожденных на генетические заболевания

Для установления родства

Для изучения генов, участвующих в образова-нии раковой опухоли

Для анализа археологического материала

Для идентификации

людей

опухоль

Выбор объекта для выделения ДНК

ДНК, как известно, есть в каждой клетке, а значит, выделить её можно из любой ткани — даже из костей животных, чешуи рыб или древесины, где клеток не так уж много по сравнению с объёмом внеклеточного вещества.

Во всех тканях организма как животного, так и растения, ДНК, как правило, одинакова. Отличаются эти ткани тем, что в одних из них помимо вещества наследственности больше почти ничего нет (молоки селёдки), а в других, таких, как костная ткань, содержание ДНК относительно невелико. Кроме того, существуют ткани, в клетках которых имеется удвоенный набор хромосом (к тетраплоидным относятся, в частности, клетки печени), а потому и ДНК в них в два раза больше, чем во всех остальных. В семенах растений относительное, содержание ДНК выше, чем в стебле, а из молодых растущих побегов её можно выделить существенно больше, чем из такого же по объёму куска одревесневшего ствола.

В общем, если перед исследователем не стоит какой-то специальной задачи, он старается выбрать для работы ткань, в которой мало межклеточного вещества и много самих клеток. Причём желательно, чтобы ткань легко распадалась на эти составляющие, а клетки не были перегружены белками (как мышечные), липидами(как жировые) или полисахаридами (как клетки мозга).

Материалы для выделения ДНК в домашних условиях:

• банан
• средство для мытья посуды (Fairy)
• поваренная соль
• дистиллированная вода
• холодный этиловый спирт 96%
• пакет с замком zip lock
• кусок марли 10х10 см для фильтрования
• деревянная палочка
• пластиковая ложка
• пластиковая или стеклянная пробирка (50 мл)
• банковская резинка
• маленькая пробирка (пенициллинка)

План выделения ДНК из банана

Механическое измельчение банана

Разрушение клеточных стенок

Освобождение

ДНК от белков

Отделение ДНК от клеточных обломков

Осаждение ДНК

Сбор ДНК

Процедура выделения ДНК

1. Поместить банан в пакет с замком zip lock, закрыть замок. Измельчить банан, раздавив его пальцами и превратив в кашицу.

2. Открыть пакет и перенести банановую кашицу в пластиковый стакан с помощью пластиковой ложки.

3. В чистом пластиковом стакане приготовить лизирующий буфер: смешать 50 мл дистиллированной воды, 4 чайных ложки средства для мытья посуды (Fairy) и 2 ложки соли. Аккуратно перемешать (без образования пены), чтобы соль и средство для мытья посуды растворились в воде.

4. Добавить лизирующий буфер к банановой кашице и перемешать 2-3 минуты.

5. Накрыть куском марли пластиковую (стеклянную) пробирку и зафиксировать её резинкой.

6. Профильтровать банановый экстракт, полученный в п.4, через марлю. Собрать в пробирку жидкость, банановую кашицу выбросить.

7. МЕДЛЕННО и осторожно по стенке пробирки влить холодного этилового спирта 96% до образования слоя на поверхности бананового экстракта. Не перемешивайте пробирку и через 1-2 минуты можно увидеть белые нити ДНК на границе двух слоёв.

8. Нити ДНК можно аккуратно собрать деревянной палочкой и поместить в маленькую пробирку с 96% спиртом.

Как выглядит выделенная ДНК?

Чистые кристаллы ДНК похожи на клубки спутанных нитей, но не надо забывать, что вы видите именно кристаллы вещества, а не его макромолекулы, и сказать по их внешнему виду, какие гены содержит выделенная вами нуклеиновая кислота, конечно, невозможно. Чтобы узнать это, придется снова растворять ДНК. Впрочем, « прочесть » последовательность нуклеотидов в домашних условиях, увы, невозможно: для этого нужны не только специальные приборы, но и дорогие реактивы. Однако если вы уже хорошо рассмотрели кристаллы и они успели подсохнуть, можете понаблюдать за тем, как ДНК растворяется. Она вначале набухает, становясь похожей на студенистую медузу, и лишь спустя несколько дней раствор делается однородным. Процесс можно ускорить, если пробирку почаще встряхивать.

Белые кристаллы ДНК