Вступление. Актуальность темы.
В последние годы повысился интерес исследователей к проблеме вагинальных микозов, что объясняется значительно возросшим числом больных данной патологией. Это связывают с воздействием различных факторов внешней среды на организм человека, изменяющейся экологией окружающей среды, широким использованием химических средств, загрязнением воздуха, длительным и не всегда рациональным применением антибактериальных препаратов, особенно антибиотиков широкого спектра действия, широким применением кортикостероидов и цитостатических препаратов, противотрихомонадных и контрацептивных средств, ростом числа лиц, злоупотребляющих алкоголем и наркотиками. Широкое использование новых медицинских технологий (трансплантантной и пластической хирургии, инвазивных диагностических лечебных процедур, интенсивной иммуносупрессивной и цитостатической терапии и др.), пандемия ВИЧ – инфекции также приводят к увеличению популяции иммуноскомпроментированных пациентов с высоким риском развития поверхностных и глубоких грибковых инфекций.
Отечественные лекарственные препараты, применяемые в микологии относятся к двум группам: антифунгальным антибиотикам и производным имидазола. Антибиотики обладают узким спектром действия, мало эффективны в отношении бактериальной флоры, что создаёт значительные неудобства в терапии микозов. У препаратов – производных имидазола также имеются серьёзные недостатки. Длительное их применение приводит к кумуляции в организме, вызывает угнетение функции иммунной системы, половых желез, надпочечников. А также они практически неактивны в отношении патогенной бактериальной микрофлоры. Наиболее эффективные препараты импортируются из-за рубежа. Кроме этого, традиционная фармакотерапия вагинальных микозов часто приводит к появлению резистентных штаммов патогенных микроорганизмов, возникновению аллергических проявлений и нарушений нормального вагинального биоценоза.
В связи с этим представляет интерес поиск новых лекарственных препаратов для терапии вагинальных микозов среди веществ фитопроисхождения, в частности эфирных масел высших растений. Эфирное масло чабреца обладает широким спектром антимикробной активности, отсутствием резистентности при длительном использовании, практической безвредностью, хорошей переносимостью и наличием отечественного серийного выпуска.
Разработка новых мягких лекарственных средств на основе эфирного масла чабреца для терапии вагинальных микозов представляет научный и практический интерес, позволит расширить номенклатуру эффективных и доступных антимикробных препаратов для отечественного здравоохранения.
Объект исследования – разработка оптимального состава и рациональной технологии вагинальных суппозиториев с эфирным маслом чабреца. Изучение специфической активности и безвредности разработанной лекарственной формы.
Предмет исследования – эфирное масло чабреца, вспомогательные вещества (суппозиторные носители), мягкие лекарственные формы.
Раздел 1.
Вагинальный микоз – одно из самых распространённых заболеваний, которое составляет 30 -40 % в структуре инфекционной патологии нижнего отдела полового тракта. За последние годы частота выявления кандидоза возросла в 2 раза, увеличилось количество хронических и часто рецидивирующих форм грибкового поражения влагалища. Около 75% женщин в течение жизни переносят хотя бы один раз вагинальный микоз, а у 40 -50% из них развивается рецидив.
Возбудителем заболевания являются дрожжеподобные грибы рода Candida. Эти грибы представляют собой одноклеточные аэробные микроорганизмы от 1.5 до 10 мкм овальной или округлой формы, образуют псевдомицелий в виде цепей вытянутых клеток, а также бластоспоры – почкующиеся клетки в местах разветвления псевдомицелия, представляющие собой элементы размножения. Оптимальными для роста и размножения грибов являются температура 21 – 37 С и слабокислая среда.
Кандидоз – яркий пример заболевания, вызываемого условно- патогенной микрофлорой. Клетки гриба обитает как в окружающей среде, так и на поверхности кожных покровов и слизистых оболочках здорового человека (полость рта, кишечник), в том числе во влагалище. При снижении защитных сил организма грибы могут вызвать заболевание. Обычно кандидоз затрагивает только поверхностные слои влагалищного эпителия, когда устанавливается динамическое равновесие между грибами, которые не могут проникнуть в более глубокие слои слизистой оболочки, и организмом, который сдерживает такую возможность, но не способен полностью избавиться от возбудителя. Нарушение этого равновесия приводит либо к обострению заболевания, либо к выздоровлению или ремиссии. Только в редких случаях преодолевается эпителиальный барьер и происходит проникновение инфекции в подлежащие ткани.
Особого внимания заслуживает вагинальный кандидоз у беременных, который встречается в 30 – 40 % наблюдений. Высокая частота развития этого заболевания у беременных объясняется повышенным содержанием гормонов эстрогена и прогестерона в эпителиальных клетках, которые проявляют иммунодепрессивный эффект, а также накоплением гликогена.
Медикаментозная терапия вагинального кандидоза сводится к необходимости максимально полной элиминации возбудителя, а также к подбору антимикотического препарата, его дозы и длительности приёма в зависимости от формы течения и оценки эффективности лечения.
Лекарственные средства, применяемые для лечения вагинального кандидоза должны отвечать следующим требованиям:
иметь широкий спектр действия;
обладать избирательным противогрибковым (фунгицидным или фунгистатическим) действием;
иметь минимальную частоту выработки резистентности у возбудителей;
быть хорошо совместимыми с препаратами других фармакологических групп;
быть нетоксичными даже в случае длительного применения;
длительно действовать;
быть экономически доступными.
Для лечения генитального кандидоза применяют:
препараты полиенового ряда (нистатин, леворин, натамицин и др.);
препараты имидазолового ряда (кетоконазол, клотримазол, миконазол и др.);
препараты триазолового ряда (флуконазол, интраконазол и др.);
разных химических групп (флузитозин, нитрофунгин, декамин, препараты йода и др.).
По характеру действия противогрибковые средства подразделяют на специфические, избирательно подавляющие жизнедеятельность грибков и неспецифические, обладающие широким спектром антимикробного эффекта и не имеющие специфического механизма действия.
По типу действия на грибковую клетку различают фунгицидные и фунгистатические препараты.
По источнику получения различают две группы антимикотиков: антибиотики и синтетические средства.
Противогрибковые средства применяют как местно так и резорбтивно. При вагинальном кандидозе внутривагинальный и пероральный способ терапии одинаково эффективны. Как правило, при первичных эпизодах заболевания назначают препараты местного действия. К преимуществам местного использования лекарственных средств относят:
отсутствие системного влияния на организм, т.к. они не всасываются из влагалища, что важно при беременности;
мало побочных эффектов;
возможность создания высокой концентрации препарата непосредственно в зоне поражения.
Для повышения эффективности противогрибковой терапии рекомендуют комбинировать пероральные и препараты местного применения.
Одним из первых антимикотиков в 50-х годах ХХ века был синтезирован нистатин. Он применяется для лечения и профилактики кандидозов кожи, слизистых оболочек и ЖКТ. Но он плохо всасывается в ЖКТ, его биодоступность всего 3 -5%. Кроме того, большое количество устойчивых штаммов гриба снижают область его применения. При этом нистатин мало токсичен и хорошо переносится больными. К полиеновым антибиотикам также относится леворин. Но он обладает худшей переносимостью, чем нистатин и противопоказан при беременности, т.к. проявляет тератогенный эффект. Более современным полиеновым препаратом является – натамицин (пимафуцин). Пимафуцин не всасывается из ЖКТ, поэтому его применяют только местно в виде влагалищных свечей или в виде крема. Низкая токсичность, отсутствие системного действия делают пимафуцин препаратом выбора для лечения вагинальных микозов у беременных и при лактации.
Производные имидазола обладают высокой эффективностью и низкой токсичностью. К ним относятся: клотримазол, кетоконазол (низорал), миконазол, бутоконазол и др. Механизм действия имидазолов заключается в нарушении синтеза эрготерола, являющегося составной частью клеточной мембраны. У ряда препаратов этой группы имеются серьёзные побочные эффекты: кумуляция, тошнота, головная боль, слабость, фотофобия, гепатит, алопеция, артралгия, миалгия, гипертензия, тромбофлебит, лейкопения, развитие отита, блефарит, а низорал угнетает иммунную систему, функцию половых желез и надпочечников.
При системном лечении вагинального кандидоза применяют производные триазола – флюконазол (дифлюкан, микосист, дифлазон, форкан) и итраконазол (орунгал, ирунин). Они ингибируют синтез эргостерола клеточной мембраны грибов и оказывают фунгицидное действие. Обладают высокой биодоступностью. Эффективен в отношении дрожжевых грибов, возбудителей кандидоза, плесневых грибов, дерматофитов. Противопоказаниями к применению являются гиперчувствительность, беременность, одновременный приём внутрь терфенадина, астемизола, цизаприда, мидазолама и триазолама.
Так же для лечения вагинальных микозов применяют антимикотические средства неспецифического действия. Эта группа включает большое число препаратов, которые можно отнести к так называемым кожным антисептикам и дерматологическим средствам, применяемым местно для лечения поверхностных инфекций и микозов. Часть этой группы не являются этиотропными ввиду отсутствия фунгицидного и фунгистатического эффекта.
С каждым годом прогрессивно увеличивается частота вульвовагинитов, имеющих смешанную бактериально-грибково-трихомонадную этиологию. Попытка решения этой проблемы с помощью широкого внедрения в практику различных новейших антибиотиков не дала ожидаемых результатов и даже осложнила ситуацию: с одной стороны, появилось большое количество резистентных штаммов, не поддающихся терапии, а с другой – резко увеличилась частота развития дисбактериоза влагалища и различных дисбиотических состояний, как осложнений этой терапии. В свою очередь развитие дисбактериоза приводит к уменьшению количества лакто – и бифидумбактерий, снижению кислотности влагалищной среды, нарушению физиологических механизмов защиты и как результат – к резкому увеличению числа рецидивов заболеваний. Таким образом, было сформировано представление о том, что по настоящему эффективное лечение вагинитов может проводиться только препаратом, обладающим одновременно трихомонацидным, бактерицидным и противогрибковым действием. Одним из решений данной проблемы является применение комбинированных препаратов, например, «Полижинакс», состоящий из нистатина, неомицина и полимиксина В. Неомицин – антибиотик из группы аминогликозидов, эффективен в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных кокков, в том числе возбудителя гонореи, а также кишечной палочки, коринебактерий и др. Полимексин В активен в отношении синегной палочки. Также на фармацевтическом рынке есть «Тержинан», состоящий из тернидазола, действующего на анаэробную микрофлору и трихомонады, неомицина, нистатина и преднизолона, купирующего симптомы воспаления.
Тем не менее применение комбинированных препаратов не позволяет избежать резистентности. И что самое неприятное, что развивается перекрёстная резистентность, т.е. устойчивость к нескольким антибиотикам сразу.
Таким образом, анализ современного состояния фармакотерапии вульвовагинального кандидоза показывает, что современное практическое здравоохранение обладает достаточным количеством эффективных лекарственных средств при терапии патологии в острой форме, особенно в начальной стадии. Терапия хронического и рецидивирующего урогенитального кандидоза и кандидозного вульвовагинита, осложнённого наличием бактериальной микст – инфекции имеет много сложностей. Ещё более затруднительное положение при терапии данной патологии у беременных, т.к. большинство современных антимикотиков имеют ограничение в этот период жизни женщины. Частота вагинальных кандидозов у беременных достигает 30 -45 %, что обусловлено изменениями гормонального баланса. Отсутствие своевременной эффективной терапии приводит к развитию нежелательных осложнений как для новорожденных так и для роженицы.
На сегодняшний день лекарственные средства для лечения вагинального кандидоза выпускают как отечественные производители («Нижфарм»): иодоксид, осарбон, гексикон, ливарон, синтомицин, а также зарубежные:
- «Байер»: нео – Пеноран Форте, Нео – Пеноран, Гино – Травоген;
- «Гедеон Рихтер»: гинофорт, клиндекс;
- «Пфайзер»: далацин;
- «ТеваФармацевтикалИндастриз»: микагол 150, микагол 300;
- «Поликем»: макмирор Комплекс;
- АсталласФармаЮроп: пимафуцин;
- «Сагмел»: гинезол 7 (С), гинезол 7;
- «Фармаприм»: метромикон –Нео, кетоконазол, клотримазол, метранидазол, клиндамицин, примафугин;
- фармацевтический завод ЭГИС: бетадин, залаин овули.
Длительное отсутствие на фармацевтическом рынке новых противогрибковых препаратов, развитие лекарственной устойчивости микроорганизмов к антибиотикам и уросептикам заставляют обратить внимание на природные вещества растительного происхождения, обладающие антимикотическим и антибактериальным действием. Природные соединения имеют ряд преимуществ перед применением синтетических противогрибковых средств:
подавляют рост микоорганизмов, резистентных к антибиотикам;
не угнетают иммунитет, но являются модуляторами многих его звеньев;
предотвращают развитие дисбиоза.
Среди природных средств, перспективных для включения в составы вагинальных лекарственных средств выделяются эфирные масла, многие из которых обладают антисептическим, противовоспалительным, иммуномодулирующим, спазмолитическим и регенерирующим действием. Антисептическое действие эфирных масел распространяется на грамположительные, грамотрицательные бактерии, различные виды грибов, простейших и вирусов. При этом достаточно высокая активность в отношении патогенных микроорганизмов сочетается с практической безвредностью в отношении организма человека. При длительном применении фармакотерапевтических средств на основе эфирных масел не развивается резистентность. Механизм антисептического действия большинства эфирных масел состоит в разрушении периферической цитоплазматической мембраны микроорганизма, что приводит к уменьшению выделения энергетических ресурсов, необходимых для жизнедеятельности микробной клетки и гибели последней. Таким образом, эфирные масла предотвращают создание микроорганизмами собственных механизмов защиты и адаптации к агрессивным агентам. При этом они не вызывают изменений в генетическом аппарата клетки, т. е. не обладают мутагенным действием.
Высокую антибактериальную активность с наличием незначительного противогрибкового эффекта проявляют эфирные масла чайного дерева, шалфея, ромашки, лаванды, розмарина, моранды дудчатой, сосны обыкновенной, бархатцев мелкоцветковых.
Одним из наиболее перспективных для применения в вагинальных лекарственных средствах для фармакотерапии вагинальных микозов, в том числе и осложненных бактериальным компонентом является эфирное масло чабреца. Тимьян обыкновенный или чабрец – лекарственное растение, применяемое в фармации в виде травы, эфирного масла, в сиропах, леденцах и таблетках. Фармакологическое действие растительного сырья – бактерицидное фунгицидное.
Эфирное масло чабреца проявляет сильное противогрибковое и противомикробное действие, главным образом, за счёт высокого содержания тимола. Тимол обладает амфипатичными и гидрофобными свойствами, что объясняет его способность действовать на структуру клеточных мембран и электростатическую.
Биофармацевтические аспекты создания мягких вагинальных лекарственных форм.
Для проявления фармакологической активности действующее вещество должно сначала высвободиться из лекарственного средства и вступить во взаимодействие с клеточной мембраной и другими органоидами патогенного микроорганизма. Существенное значение на эти процессы имеют следующие фармацевтические факторы:
природа основы и других веществ (ПАВ, консервантов, загустителей и т.д.);
вид вагинальной аппликации (вагинальные суппозитории, таблетки, капсулы, мази и т.д.);
способ приготовления лекарственной формы (прессование, выливание, диспергирование и др.).
Научно обоснованный выбор этих факторов с учётом анатомо – физиологических особенностей мочеполовых органов, их динамичного биоценоза, а также особенностей патогенеза заболеваний способствует эффективности получения вагинальных лекарственных препаратов.
К суппозиторным основам предъявляются следующие требования:
должны быть достаточно твёрдыми при комнатной температуре и плавиться (или растворяться) при температуре не выше, чем 37 С, т.е. должны иметь способность резко переходить от твёрдого состояния к жидкости, минуя стадию размягчения – мазевидную стадию обладать достаточной вязкостью, отсутствием запаха, обеспечивать максимальный контакт между лекарственными веществами и слизистой оболочкой;
должны быть химически и фармакологически индифферентными, не обладать раздражающим действием и не изменяться под действием внешних факторов (света, тепла, влаги, кислорода воздуха, микроорганизмов);
должны легко приобретать соответствующую форму, смешиваться с возможно большим количеством лекарственных веществ, не взаимодействовать с ними и быть стойкими при хранении;
должны легко высвобождать лекарственные вещества, способствовать проявлению их фармакологического действия, что зависит как от свойств основ, так и от способа введения лекарственных веществ в основу;
должны обладать соответствующими реологическими показателями и оптимальными структурно – механическими свойствами.
Качество основ определяется по НТД.
В настоящее время для приготовления суппозиториев применяется обширный ассортимент основ, различающихся по физико – химическим свойствам, которые можно разделить на 2 группы: гидрофобные и гидрофильные.
В качестве гидрофобных основ применяют масло какао, сплавы масла какао с парафином и гидрогенизированными жирами, растительные и животные гидрогенизированные жиры, твёрдый жир, ланоль, сплавы гидрогенизированных жиров с воском, твёрдым парафином и другие основы, разрешенные для медицинского использования.
В качестве гидрофобных основ используют: желатино – глицериновые и мыльно – глицериновые гели, сплавы полиэтиленоксидов различной молекулярной массы и другие, разрешенные к медицинскому применению.
Процесс всасывания лекарственных средств из этих основ происходит независимо от температуры их плавления, так как всасывание обусловлено лишь быстротой диффузии лекарственных средств из основы и скоростью растворения самих основ. Эти основы могут применяться для приготовления свечей, шариков и палочек только методом выливания.
Суппозитории представляют собой как гомогенные, так и гетерогенные дисперсные системы, поэтому главная технологическая задача состоит в том, чтобы максимально диспергированные лекарственные средства равномерно распределить не только в суппозиторной массе, а и в каждой свече, придав им необходимую геометрическую форму. Суппозитории могут быть приготовлены тремя методами: выкатыванием, выливанием в формы и прессованием. Выбор метода зависит от свойств основы, её способности давать пластичные массы, скорости застывания после расплавления, текучести под давлением.
Поверхностно – активные вещества существенно влияют на реологические, физико – химические, биофармацевтические характеристики вагинальных средств. Вид и количество их, как и других вспомогательных веществ, научно обосновываются и чётко регламентируется при производстве вагинальных лекарственных форм.
При изготовлении вагинальных лекарственных форм необходимо учитывать анатомо – физиологические свойства и динамический микробиоценоз мочеполовых органов в разные возрастные периоды.
В процессе технологии суппозитории могут легко загрязняться микроорганизмами, поэтому при их приготовлении необходимо обращать внимание на строгое выполнение санитарных правил.
Раздел 2. Обоснование общей концепции исследований. Объекты и методы исследований.
При создании мягких лекарственных форм для терапии микотических и бактериальных поражений женских мочеполовых органов руководствуются современными принципами фармакотерапии, которые заключаются в необходимости разработки препаратов с максимальным терапевтическим эффектом при минимальном количестве действующих веществ и минимальном уровне побочных реакций. Для реализации этой задачи используют биофармацевтические подходы, которые оказывают содействие рациональному обоснованию состава лекарственной формы. Благодаря оптимальному выбору основы можно в значительной степени управлять уровнем терапевтического эффекта. Поэтому первоначальной задачей является выбор основы – носителя для мягкой лекарственной формы.
Выбирая рациональную основу – носитель для мягких лекарственных средств, учитывая химическую природу и физико – химические свойства активнодействующих веществ, их совместимость и возможное взаимодействие между собой, стабильность на протяжении срока хранения. Опираясь на эти данные, проводим выбор вспомогательных веществ – вида основы, ПАВ и отрабатываем технологию её изготовления.
Основа для мягких вагинальных лекарственных форм должна быть безвредной, индифферентной, легко высвобождать биологически активные вещества, иметь увлажняющее и умягчающее действие, высокие потребительские свойства – удобство и отсутствие дискомфорта при нанесении, удовлетворительную консистенцию, легкую смываемость.
Одной из важных характеристик разработанной мягкой лекарственной формы для внешнего применения является её срок и условия хранения. Для этого на протяжении определённого времени хранения наблюдают за стабильностью разработанной лекарственной формы и проводят контроль основных показателей качества и её микробиологической чистоты.
Использование такого системного подхода позволяет получить высокоэффективные, безопасные и стабильные лекарственные средства для терапии кандидозного вульвовагинита на основе эфирного масла чабреца с высокими биофармацевтическими, реологическими, фармакотехнологическими и потребительскими свойствами, позволяющие прогнозировать высокую перспективность их внедрения в практику отечественной фармации и медицины.
Объекты исследований
Эфирное масло чабреца.
Вспомогательные вещества.
Методы исследований
При выполнении работы были использованы биофармацевтические, технологические, фармакотехнологические, физико – химические, реологические, биологические методы исследований, которые позволяют объективно оценивать как образцы действующих и вспомогательных веществ, так и готовые фармакотерапевтические средства.
Органолептические показатели вагинальных суппозиториев оценивали в соответствии с ГФ Х.
Определение термостабильности исследовательский образец мягкой лекарственной формы помещают в пробирку, которую переносят в термостат с температурой 42.5 ± 2.5 С на 7 суток. Потом образец переносят в холодильник с температурой 6 ± 2 С на 7 суток. Оставляют при комнатной температуре на 3 суток. Препарат считается стабильным, если не наблюдали расслоения системы.
Среднюю массу суппозиториев устанавливали в соответствии со статьёй ГФ Х Отклонение средней массы суппозиториев, отличной от массы в разделе «Состав» не должно превышать ± 5%.
Распадаемость суппозиториев определяют в соответствии с ГФ Х. Состояние суппозиториев на липофильной основе оценивают через 30 мин, а на гидрофильной основе – через 60 мин.
Биофармацевтические исследования высвобождения тимола проводят из суппозиторных основ – носителей проводят методом равновесного диализа по Крувчинскому при температуре диализной среды 37 ± 0.5С через целлофановую полупроницаемую мембрану – плёнку «Купрофан» в станции с диффузионными ячейками Франца (производитель PermeGear, Inc., США). В качественной диализной среды с учётом растворимости тимола используем 0.1 Н раствор натрия гидроксида.
Микробиологическую чистоту вагинальных мягких лекарственных форм с эфирным маслом чабреца проводили по требованиям ГФ Х.
Определение специфической активности вагинальных мягких лекарственных форм с эфирным маслом чабреца осуществляли методами, рекомендованными ГФ Х.
Обоснование оптимальной концентрации эфирного масла чабреца в вагинальных суппозиториях.
В качестве объектов исследования с учетом липофильности эфирного масла чабреца использовали основы, содержащие 1%, 2%, 5%, 7% и 10% биологически активного вещества. Антимикробную активность изготовленных композиций исследовали методом диффузии в агар. О степени антимикробной активности судили по размеру зон задержки роста патогенных микроорганизмов. Исходя из полученных данных, оптимальной антикандидозной активностью обладает 5%-я концентрация эфирного масла чабреца. В 7% и 10% концентрации действие аналогичное с 5%. Поэтому экономически более выгодно готовить 5% концентрацию.
Технология приготовления
Для приготовления 10 вагинальных суппозиториев средней массой 4.0 г в производственном помещении для изготовления нестерильных лекарственных средств в фарфоровую чашку отвешиваем 2.0 г эфирного масла чабреца и 1.0 г твина – 80 и тщательно перемешиваем до однородной массы. 36 г масло какао измельченное. Всё тщательно перемешиваем до однородной эластичной массы.
Формируем брусок равный длинной 10 суппозиториям. Разрезаем на равные части и формируем суппозитории каждая массой по 4.0 г.
Приготовленные вагинальные суппозитории с эфирным маслом чабреца подлежат внутриаптечному контролю качества согласно методическим рекомендациям и требованиям НТД.
Методика количественного определения высвободившегося тимола согласно статье 681 ГФ Х "Тимол": точную навеску препарата растворяем в растворе едкого натра в мерной колбе ёмкостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки. 10 мл полученного раствора переносят в колбу с притёртой пробкой, прибавляют 0.5 г бромида калия, 40 мл разведённой соляной кислоты, 3 капли раствора метилового оранжевого и при сильном взбалтывании титруют 0.1 н. раствором бромата калия. К концу титрования прибавляют ещё 2 капли раствора метилового оранжевого. Исчезновение розового окрашивания жидкости указывает на конец титрования. Содержание тимола 99.1%.
Вывод: на основании комплексных технологических, физико – химических, микробиологических и фармакологических исследований разработаны оптимальный состав и технология изготовления фармакотерапевтических средств с эфирным маслом чабреца для лечения вагинальных микозов. Данная лекарственная форма имеет ряд преимуществ над применяемыми в настоящее время в медицине.
6
474
87 639 
